高效液相色譜圖固相萃取(高效液相色譜法固相萃取檢測(cè)飲料中紐甜)
紐甜也叫尼爾甜,化學(xué)名稱N-[N-(3,3一二甲基丁基)-L-α-天冬氨酰]-L-苯丙氨酸-1-甲酯,是一種功能性甜味劑,甜度達(dá)到我們熟知蔗糖的2000倍,產(chǎn)品的價(jià)格相對(duì)低廉,質(zhì)量穩(wěn)定,目在飲料零食等都有所使用。微源實(shí)驗(yàn)室查閱文獻(xiàn)資料后,實(shí)驗(yàn)了一種適用于檢測(cè)機(jī)構(gòu)的紐甜檢驗(yàn)方法。
精確稱取紐甜標(biāo)準(zhǔn)0.1 g,配制成1 mg/mL的紐甜標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,于冰箱保存;取非果肉類沉淀飲料10g左右,先用3mL甲醇,4mL水活化平衡固相萃取柱,將提取液上樣,用10mL水和2mL50%的甲醇溶液依次淋洗去除雜質(zhì),最后用甲醇:三氟乙酸溶液(100:0.015)洗脫,收集洗脫液2mL,混勻后進(jìn)樣;將標(biāo)準(zhǔn)液用超純水稀釋成濃度分別為5μg/mL,10μg/mL,20μg/mL,標(biāo)準(zhǔn)溶液。
色譜柱 (資料圖片僅供參考) | CAPCELLPAKC18(4.6mmX250mm,5μm); |
流動(dòng)相 | 乙腈:0.015%三氟乙酸溶液=30:70(v/v) |
流速 | 1.0mL/min: |
柱溫 | 30℃ |
檢測(cè)波長(zhǎng) | 210nm |
進(jìn)樣體積 | 20μL |
在上述色譜條件下進(jìn)行HPLC測(cè)定,得到飲品的色譜圖。紐甜濃度在0.5μg/mL-50μg/mL范圍內(nèi)作標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
平行測(cè)定50μg/mL紐甜標(biāo)準(zhǔn)溶液6次,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.6%。在流動(dòng)相為等度的實(shí)驗(yàn)條件下,紐甜的保留時(shí)間大約在13 min,譜圖峰形尖銳選擇性好,和其他常用甜味劑和防腐劑實(shí)現(xiàn)了較好的分離。線性關(guān)系良好,當(dāng)定容體積為2mL,進(jìn)樣20μL時(shí),方法的檢出限為0.05mg/kg。該方法滿足實(shí)際檢測(cè)需要,可以滿足食品衛(wèi)生監(jiān)督檢測(cè)工作。
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